Nuocytes from mesenteric lymph node promote allergic responses in a mouse model / Nuócitos de linfonodo mesentérico promovem respostas alérgicas em um modelo de camundongo

Abstract Introduction: Nuocytes play an important role in Type 2 immunity. However, the contribution of ILC2s to allergic rhinitis remains to be clearly elucidated. Objective: To evaluate the role of nuocytes from mesenteric lymph node on allergic responses in mice. Methods: After intraperitoneal administration of interleukin IL-25 and IL-33 to wild-type and Il17br-/-Il1rl1-/- double-deficient mice, nuocytes were purified from the the nasal-associated lymphoid tissue and mesenteric lymph nodes. Then, we assessed productions of IL-5 and IL-13 in nuocytes' cultures. Finally, we adoptively transferred the mesenteric lymph node-derived nuocytes from wild-type and Il17br-/-Il1rl1-/- mice to the murine model of allergic rhinitis to evaluate their roles in nasal allergic responses. Results: We showed that nuocytes in the mesenteric lymph nodes of wild-type mice were upregulated after application of IL-25 and IL-33, and were induced to produce IL-5 and IL-13. Numbers of sneezing and nasal rubbing as well as eosinophils were all enhanced after the adoptive transfer of wild-type nuocytes. Concentrations of IL-5, IL-13, IL-25 and IL-33 in nasal lavage fluid of allergic mice were also increased. However, nuocytes fromIl17br-/-Il1rl1-/- mice did not increase sneezing and nasal rubbing and eosinophilia, and upregulate the above cytokines in the nasal lavage fluid. Conclusion: The findings demonstrate that nuocytes from the mesenteric lymph nodes of wildtype mice promote allergic responses in a mouse model.

Resumo Introdução: Os nuócitos desempenham um papel importante na imunidade do tipo 2. No entanto, a contribuição das interleucinas ILC2s na rinite alérgica ainda precisa ser elucidada. Objetivo: Avaliar o papel dos nuócitos de linfonodos mesentéricos nas respostas alérgicas em camundongos. Método: Após a administração intraperitoneal de interleucina (IL)-25 e IL-33 em camundongos do tipo selvagem e camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- com deficiência dupla, os nuócitos foram purificados do tecido linfoide associado a mucosa nasal e linfonodos mesentéricos. Em seguida, avaliamos as produções de IL-5 e IL-13 em culturas de nuócitos. Finalmente, transferimos adotivamente os nuócitos derivados de linfonodos mesentéricos de camundongos do tipo selvagem e camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- para o modelo murino de rinite alérgica para avaliar seu papel nas respostas alérgicas nasais. Resultados: Mostramos que os nuócitos nos linfonodos mesentéricos de camundongos do tipo selvagem estavam up-regulados após a aplicação de IL-25 e IL-33 e foram induzidos a produzir IL-5 e IL-13. Os espirros e friçcão nasal, bem como os eosinófilos, aumentaram após a transferência adotiva de nuócitos do tipo selvagem. As concentrações de IL-5, IL-13, IL-25 e IL-33 no líquido da lavagem nasal de camundongos alérgicos também estavam aumentadas. Entretanto, os nuócitos de camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- não aumentaram os espirros e a friçcão nasal ou eosinofilia e up-regularam as citocinas acima no líquido de lavagem nasal. Conclusão: Os achados demonstram que os nuócitos dos linfonodos mesentéricos de camundongos selvagens promovem respostas alérgicas em um modelo de camundongo.

Estudo do tráfego linfocitário e sua modulação em camundongos, in vivo

Uma compreensão aprofundada dos mecanismos envolvidos na migração linfocitária e na sua modulação, permitiria que essas células fossem direcionadas artificialmente. Isto poderia impedir sua entrada e acúmulo em sítios indesejáveis (como por exemplo, órgãos alvo em doenças auto-imunes ou órgãos transplantados) ou, alternativamente, seria possível facilitar sua em uma situação em que o acúmulo de células efetoras funcionais fosse mandatório, como seria o caso de tumores. No presente trabalho este problema foi abordado estabelecendo-se, inicialmente, um sistema de estudo para padronização da distribuição do trêfego linfocitário, em camundongos normais, e em seguida procurou-se uma possibilidade de modular este tráfego. Foram utilizadas células linfóides marcadas com51 Cr e injetadas por via endovenosa. Duas substâncias, o antiinflamatório não esteróide Indometacina (INDO) e o agente imunossupressor Ciclosporina A (CS-A) foram utilizadas com o objetivo de verificar se seria possível modular esta distribuição linfocitária normal ou em situações inflamatórias desencadeadas por uma reação de sensibilidade de contato e por indução de tumor. CS-A foi capaz de alterar a migração linfocitária, em situações fisiológicas, para o intestino e timo enquanto INDO apenas induziu uma inibição da migração de linfoblastos periféricos para o timo. CS-A aumentou a permeabilidade do timo a linfoblastos periféricos e induziu um maior acúmulo de linfoblastos mesenféricos no intestino. Por outro lado, o tratamento de infiltrados inflamatórios com CS-A produziu efeitos paradoxais. CS-A inibiu o acúmulo de linfoblastos em tumores em pleno crescimento, mas só foi capaz de inibir parcialmente e tardiamente a entrada de células em lesões pelo sesibilizante de contato Oxazolona (OXA). Nas mesmas condições, INDO tem efeito comparável ao de CS-A, nas lesões induzidas por OXA. O tratamento deste infiltrado inflamtorio com ambas, CS-A e INDO não modificaram o efeito exercido por nenhuma delas, considerado isoladamente. O tratamento experimental com radiação, por si mesmo, induziu alterações na migração de células para o baço, LNM, intestino, pele, pulmão e timo. Tal tratamento levou ao acúmulo de linfoblastos no intestino e timo e, surpreendentemente, CS-A produziu um aumento considerável na ligração linfocitária para o intestino e timo de animais irradiados, mostrando um efeito sinergístico, sugerindo que o acúmulo dessas células nos vários modelos resulta de mecanismos diversos e que o uso de CSA não pode ser considerado de maneira exclusiva em inflamatórios de risco de linfócitos.

A better understanding of the mechanism involved on lymphocyte migration and modulation might allow these cells to be artificially directed. This could hinder the entrance and accumulation of these cells at inconvenient sites (target organs in autoimmune diseases or transplanted organs, for example) or alternatively, it woud be possible to facilitade their entrance in situations in which the accumulation of effector functional cells were mandatory as it would be case for tumors. In the present work this problem was dealt with, by initially establishing a system 1· of study to standardize the distribution of the lymphocyte traffic in normal mice and then ; it has been searched a manner of modulating such traffic. Lymphoid cells labeled with 51Cr and intravenously injected have been utilized. Two substances, the anti-inflammatory non steroid - Indometacin (INDO) and the immunosupressor agent - Cyclosporin A (CS-A), were utilized in order to verify the posibility of modulating lymphocyte distribution at inflammatory situations induced by several stimuli. CS-A has been able to alter the lymphocyte migration, in physiological situations, towards gut and thymus whereas INDO only induced an inhibition of the peripheric lymphoblasts migration towards the thymus. CS-A increasing thymus permeability to peripheric Iymphoblasts and induced a higher accumulation of mesenteric lymphoblasts in the gut. On the other hand, treatment of inflammatory infiltrates with CS-A produced paradoxical effects. CS-A inhibited the accumulation of lymphocytes in developing tumors but it was only able to inhibit the entrance of cells in lesions induced by Oxazolone (OXA), partially and at late stage. In the same conditions, INDO has comparable effect as CS-A, in lesions induced by OXA. The treatment of this inflammatory infiltrate with both CS-A and INDO did not modify the effect exerted by either of them, considered isolately. The experimental treatment with radiation, induced, on its own, modifications in the migration of cells towards spleen, mesenteric lymph nodes, gut, lungs and thymus. Such treatment led to the accumulation oflymphoblasts in the gut and surprisingly, CS-A promoted a considerable increase of the lymphocyte migration towards the gut and the thymus of irradiated animals, suggesting that such cell accumulation in the several models results from diverse mechanisms and that the use of CS-A canot be considered in an exclusive way on infiltrates rich with lymphocytes.